Сыворотка крови пациента вносится в лунку планшета, к стенкам которой прикреплены белки или фрагменты белков ВИЧ. Эти белки прочно взаимодействуют с антителами к ВИЧ, если таковые имеются в исследуемой сыворотке.
Далее, к каждой молекуле антител к ВИЧ, «выловленной» из сыворотки пациента, прикрепляется фермент, который делает эти антитела видимыми, изменяя окраску раствора в лунке: чем больше в сыворотке антител, тем темнее окраска в лунке планшета. С этого момента начинается процесс подтверждения положительного результата. На первом этапе исследование данной сыворотки повторяют в той же тест-системе в двух лунках — это позволяет исключить технические погрешности. Если результат подтвердился — наступает второй этап.
Исследование проводится в двух других тест-системах ИФА, «отсеивающие» ложноположительные результаты. Если хотя бы в одной из этих тест-систем получен положительный результат — начинается третья стадия высокоспецифичного метода иммуноблотинга – теста, подтверждающего наличие ВИЧ-инфекции.
Поскольку исследования проводятся поэтапно, то время до получения результата может составить от 1 до 10 дней.
Варианты результатов:
- «Иммуноблот отрицательный» — значит, что положительная реакция в ИФА — тестах была ложной или неспецифической, ВИЧ-инфекции нет.
- «Иммуноблот положительный» — в крови обнаружены антитела к ВИЧ, необходим четвертый, последний этап — повторный забор крови с документом удостоверяющем личность (паспортом) в центре Анти-СПИД и повторное исследование, чтобы исключить техническую ошибку при заборе крови. Только после положительного результата по повторной сыворотке подводится окончательный итог — «антитела к ВИЧ — обнаружены», у человека — ВИЧ-инфекция.
- «Иммуноблот сомнительный». Это означает, что сыворотка реагирует не со всеми, а с какими-то отдельными белками ВИЧ, нанесенными на нитроцеллюлозные полоски блота, т. е определяется только часть антител к белкам ВИЧ. Неопределенный результат может означать, что человек инфицирован ВИЧ, но еще не весь спектр антител выработан организмом. Нередко по прошествии 1–3–6 месяцев с момента получения сомнительного результата в сыворотке появляются одно за другим все антитела и ВИЧ. В этом случае сомнительный результат — свидетельство начальной стадии ВИЧ-инфекции. Или же, результат неопределенного иммуноблота показывает, что человек не инфицирован, но в его организме есть антитела похожие на истинные антитела к ВИЧ. Такой результат может быть у больных туберкулезом, онкобольных, реципиентов, получающих многократные гемотрансфузии (переливания крови), у беременных женщин. При неопределенном результате ИБ пациент находится под наблюдением врача-инфекциониста и повторяет анализ.
Проходя тестирование в Ханты-Мансийском центре по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями граждане РФ имеют возможность обследоваться на ВИЧ анонимно и бесплатно, получить полное консультирование у инфекционистов и психологов как до, так и после прохождения теста.
Существует методика, позволяющая определять не антитела к вирусу ВИЧ, а сам вирус в организме, это методика ПЦР — полимеразной цепной реакции. Она доказала свою эффективность и используется для:
-
определения наличия или отсутствия самого ВИЧ в «период окна», при неясном результате иммуноблота;
-
для определения необходимости назначения лечения и контроля лечения;
-
для определения ВИЧ-статуса новорожденных, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей.
ПЦР позволяет определить совсем незначительное количество вирусных частиц в зараженном материале. Проведение ПЦР требует сложного лабораторного оборудования и высокой квалификации специалистов. Метод очень дорогостоящий и в массовом тестировании на ВИЧ, которое согласно законодательству проводится для населения бесплатно, не применяется.
В экстренных ситуациях (во время родов, операций по жизненным показаниям) применяют «экспресс-тесты». Их проведение не требует сложного оборудования и высокой квалификации персонала. Результат экспресс-теста необходимо подтверждать стандартным тестированием на ВИЧ.